LS/T 6153-2025 粮油检验 谷物中脱氧雪腐镰刀菌烯醇的测定 荧光免疫层析快速定量法

　　ICS67.040

　　CCS X 11

　　中华人民共和国粮食行业标准

　　LS/T6153—2025

　　粮油检验 谷物中脱氧雪腐镰刀菌烯醇的

　　测定 荧光免疫层析快速定量法

　　Inspectionofgrainandoils—Determinationofdeoxynivalenolincereals—

　　Fluorescentimmunochromatographicmethod

　　2025-06-09发布2025-12-09实施

　　国家粮食和物资储备局发布

　　前 言

　　本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则 第1部分:标准化文件的结构和起草规则》的规定

　　起草。

　　请 注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。

　　本文件由国家粮食和物资储备局提出。

　　本文件由全国粮油标准化技术委员会(SAC/TC270)归口。

　　本文件起草单位:国家粮食和物资储备局科学研究院、中储粮成都储藏研究院有限公司、中储粮江

　　苏质检中心有限公司、中国农业大学、安徽省粮油产品质量监督检测站、江南大学、北京工商大学、

　　广西壮族自治区粮油质量检验中心、陕西省粮食质量安全中心、上海市农业科学院、北京市农林科学院、

　　广西-东盟食品检验检测中心、南京微测生物科技有限公司、北京维德维康生物技术有限公司、江苏省苏

　　微微生物研究有限公司、广东达元绿洲食品安全科技股份有限公司、北京中仪智控科技有限公司、北京

　　济全生物科技有限公司。

　　本文件主要起草人:叶金、王松雪、崔华、温凯、陈晋莹、袁华山、胡斌、孙秀兰、李健、李丽、吴宇、

　　伍先绍、蒋国振、刘洪美、韩铮、王蒙、王海波、李森、纪剑、孙嘉笛、聂冬霞、倪保霞、肖理文、马立才、

　　张海涛、刘芸、李勇、邓庆、王平东、陈红亮。

　　Ⅰ

　　LS/T6153—2025

　　粮油检验 谷物中脱氧雪腐镰刀菌烯醇的

　　测定 荧光免疫层析快速定量法

　　1 范围

　　本文件描述了荧光免疫层析法测定谷物中脱氧雪腐镰刀菌烯醇的方法,规定了试剂及材料、仪器及

　　设备、样品制备、样品测定、结果表述和精密度的要求。

　　本文件适用于小麦、玉米中脱氧雪腐镰刀菌烯醇的快速定量检测。

　　本文件的方法检出限为100μg/kg,定量限为260μg/kg。

　　2 规范性引用文件

　　下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中,注日期的引用文

　　件,仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于

　　本文件。

　　GB/T5491 粮食、油料检验 扦样、分样法

　　GB/T6682 分析实验室用水规格和试验方法

　　GB/T27404 实验室质量控制规范 食品理化检测

　　3 术语和定义

　　本文件没有需要界定的术语和定义。

　　4 原理

　　试样中脱氧雪腐镰刀菌烯醇与含铕-螯合物的聚苯乙烯微球等荧光材料标记的特异性抗体发生结

　　合后,抑制了层析过程中抗体与硝酸纤维膜检测线上脱氧雪腐镰刀菌烯醇-BSA 偶联物的免疫反应,使

　　检测线上荧光强度降低,通过荧光强度变化和荧光分析仪的内置标准曲线,自动计算出试样中脱氧雪腐

　　镰刀菌烯醇的含量。

　　5 试剂及材料

　　除另有说明外,所用试剂均为分析纯,实验室用水应符合GB/T6682中三级水的要求。

　　5.1 脱氧雪腐镰刀菌烯醇荧光免疫层析卡(以下简称“检测卡”):性能应满足附录A 的要求,不同品牌

　　不同批次的检测卡使用前,应按照附录A 进行检测卡性能测定。

　　5.2 10μg/mL脱氧雪腐镰刀菌烯醇标准储备溶液。

　　5.3 0.1μg/mL脱氧雪腐镰刀菌烯醇标准溶液:准确吸取10μg/mL脱氧雪腐镰刀菌烯醇标准储备溶

　　液100μL于10mL容量瓶中,用水定容至刻度线。冷藏条件下可保存3个月。

　　5.4 样品稀释液:由检测卡配套提供,或根据产品说明书配制。

　　5.5 离心管:50mL和1.5mL。

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　　LS/T6153—2025

　　6 仪器及设备

　　6.1 粉碎机:转速≥1000r/min。

　　6.2 分样筛:1mm 孔径。

　　6.3 天平:感量0.01g。

　　6.4 离心机:转速≥4000r/min。

　　6.5 振荡器:转速≥2500r/min。

　　6.6 计时器。

　　6.7 真菌毒素荧光定量快速检测仪:激发波长为365nm±5nm,发射波长为615nm±5nm,或根据产

　　品说明书设置。

　　6.8 定性滤纸:孔径>8μm。

　　6.9 孵育器:能进行控温(控温精度±1℃)孵育,具有时间调整功能。

　　7 样品制备

　　7.1 扦样与分样

　　按照GB/T5491执行,在采样过程中,应防止样品污染,取代表性样品不少于500g。

　　7.2 样品粉碎

　　用粉碎机(6.1)将被测样品粉碎至全部通过1mm 分样筛(6.2),充分混合均匀。

　　7.3 待测溶液制备

　　用天平(6.3)准确称取粉碎后的样品5.0g(精确到0.01g)于50mL离心管(5.5)中,加入20mL

　　水。使用振荡器(6.5)提取5min~7min,静置3min,过滤或离心得上清液。准确吸取450μL平衡至

　　室温的样品稀释液(5.4)与50μL上清液涡旋混合,此溶液为待测溶液。

　　注:不同厂家检测卡所用的样品制备方法可能不同,需按照产品使用说明中规定方法进行。

　　8 样品测定

　　8.1 将检测卡(5.1)放置室温平衡15min。

　　8.2 仪器校准:选取测试项目为脱氧雪腐镰刀菌烯醇,准确吸取100μL脱氧雪腐镰刀菌烯醇标准溶液

　　(5.3)通过样品稀释液(5.4)稀释10倍后,加到检测卡加样小孔中,在室温或在孵育器(6.9)孵育10min

　　后,将其放入真菌毒素荧光定量快速检测仪(6.7)中,点击仪器主界面“测量”菜单中“标准测量”按钮,然

　　后按“是”按钮进行校准。

　　8.3 样品检测:准确吸取100μL待测溶液(7.3),加到检测卡加样小孔中,室温孵育10min后,将其放

　　入真菌毒素荧光定量快速检测仪(6.7)中,点击仪器主界面“测量”菜单进行测量,即可读取样品中脱氧

　　雪腐镰刀菌烯醇的含量。

　　注:不同厂家真菌毒素荧光定量快速检测仪操作菜单和读取界面可能不同,需按照产品使用说明中规定进行。

　　9 结果表述

　　试样中脱氧雪腐镰刀菌烯醇含量由真菌毒素荧光定量快速检测仪自动计算并显示,单位为μg/kg。

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　　LS/T6153—2025

　　计算结果以重复性条件下获得的两次独立测定结果的算术平均值表示,保留至小数点后两位。

　　10 精密度

　　在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不应超过算术平均值的20%。在再现性条

　　件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不应超过算术平均值的25%。

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　　LS/T6153—2025

　　附 录 A

　　(规范性)

　　荧光免疫层析卡性能评价要求

　　A.1 检出限和定量限

　　通过对20个独立的空白样品进行测定,检出限以空白样品20次测定结果的均值加3倍标准偏差

　　计算;定量限以空白样品20次测定结果的均值加10倍标准偏差计算,其结果应小于或等于产品标示值

　　并满足本文件。

　　A.2 准确性和重复性

　　采用高(2000μg/kg)、中(1000μg/kg)、低(500μg/kg)3个含量水平的脱氧雪腐镰刀菌烯醇自然

　　污染有证标准物质或采用国家标准方法定值的自然污染样品,每个含量水平测试不低于6次。针对每

　　个含量水平的准确率应在80%~120%容许范围内,重复性相对标准偏差应小于15%。