DB50/T 1825-2025 段木灵芝菌种生产技术规程

　　重庆市地方标准

　　DB 50/T 1825—2025

　　段木灵芝菌种生产技术规程

　　2025 - 07 - 07 发布2025 - 10 - 07 实施

　　重庆市市场监督管理局发布

　　前 言

　　本文件按照GB/T 1.1-2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定

　　起草。

　　请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。

　　本文件由重庆市药物种植研究所提出。

　　本文件由重庆市农业农村委员会归口并组织实施。

　　本文件起草单位：重庆市药物种植研究所、重庆市康泽科技开发有限责任公司、重庆市中药研究院、

　　重庆维近生态农业发展股份有限公司、重庆天同生态农业有限公司。

　　本文件主要起草人：雷美艳、赵小红、肖波、胡开治、蒲潇、韩量、杨小玉、贺宗毅、高维琼、夏

　　闳缤。

　　DB50/T 1825—2025

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　　段木灵芝菌种生产技术规程

　　1 范围

　　本文件规定了段木灵芝菌种生产条件、设施设备、生产技术、档案管理的要求。

　　本文件适用于段木灵芝菌种生产。

　　2 规范性引用文件

　　下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，

　　仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本

　　文件。

　　NY/T 528 食用菌菌种生产技术规程

　　NY/T 1742 食用菌菌种通用技术要求

　　3 术语和定义

　　本文件没有需要界定的术语和定义。

　　4 生产条件

　　应符合NY/T 528 的规定。

　　5 设施设备

　　5.1 基本设施

　　具备配料室、装袋室、灭菌室、接种室、培养室、贮藏室等设施。

　　5.2 基本设备

　　粉碎机、磅秤、天平、高压灭菌锅或常压灭菌锅、操作台、超净工作台、空调、除湿机、培养架、

　　恒温培养箱、冰箱、显微镜等。生产量大的菌种厂还应配备搅拌机、装袋机。

　　6 生产技术

　　6.1 母种生产

　　6.1.1 PDA 培养基制备

　　称取200 g 马铃薯切成小块加1000 mL 水煮沸20 min～30 min，纱布过滤，取滤液加入20 g 葡

　　萄糖和20 g 琼脂粉，琼脂完全融化后定容至1000 mL，pH 自然。

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　　6.1.2 分装和灭菌

　　将配制好的PDA 培养基分装至200 mL 组培瓶，每瓶30 mL～40 mL，分装后进行高压蒸汽灭菌，

　　121 ℃ 保持25 min～30 min。

　　6.1.3 无菌检测

　　随机抽取3%～5% 的组培瓶(每批抽样量不得少于10 瓶)，在(28±2 )℃下培养3 d～5 d，检

　　查有无微生物菌落，无菌落的为合格。

　　6.1.4 接种

　　在无菌室或超净工作台中严格按照无菌操作规程接种，接种完成后及时标记菌种信息。

　　6.1.5 培养

　　母种置于(26±1)℃，空气湿度50%～60% 的恒温恒湿培养箱中避光培养至菌丝长满培养基平面。

　　分别于接种后第3 d 和第7 d 进行逐个检查，挑出未活、污染和生长不良的不合格培养瓶。

　　6.1.6 母种质量标准

　　母种感官质量要求见表1。

　　表1 母种质量要求

　　项目要求

　　容器无损、洁净

　　培养瓶盖体干燥、洁净、无损、能透气和滤菌

　　培养基装入量30 mL～40 mL

　　菌

　　种

　　外

　　观

　　菌丝生长量长满培养基平面

　　菌丝体特征菌丝洁白、绒毛状、生长致密、均匀、健壮

　　菌丝体表面均匀、舒展、平整

　　菌丝体分泌物无

　　菌落边缘整齐

　　杂菌菌落无

　　培养瓶底部外观培养基不干缩、无积水、无暗斑

　　6.1.7 母种保藏

　　在4 ℃～6 ℃ 下避光保存，保藏期不超过90 d。

　　6.2 原种生产

　　6.2.1 培养料

　　杂木屑78%、麦麸15%、玉米粉5%、过磷酸钙1%、石膏0.5%、石灰0.5%，要求原料新鲜、洁净、

　　干燥、无虫、无霉、无异味。

　　6.2.2 拌料

　　准确称取培养料，充分拌匀，含水量控制在60%～65%。

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　　6.2.3 分装

　　宜采用规格为650 mL 玻璃菌种瓶分装。菌种瓶要求洁净、无损。

　　6.2.4 灭菌

　　高压蒸汽灭菌，121 ℃～124 ℃，保持1.5 h～2.0 h。

　　6.2.5 接种

　　培养料冷却至28 ℃ 以下，严格按照无菌操作规程接种母种，每瓶接种1 cm×1 cm 菌块1 块～

　　2 块。并及时标记菌种名称、接种日期等信息。

　　6.2.6 培养

　　培养温度(26±2)℃、空气湿度50%～60%，培养环境洁净、通风、避光。

　　6.2.7 培养期检查

　　培养3 d 后开始检查，及时清理污染、生长不良等不合格培养瓶。

　　6.2.8 原种质量标准

　　原种感官质量要求见表2 。

　　表2 原种质量要求

　　项目要求

　　容器无损、洁净

　　培养瓶盖体干燥、洁净、无损、能透气和滤菌

　　培养基上表面距瓶口的距离(50±5)mm

　　菌

　　种

　　外

　　观

　　菌丝生长量长满容器

　　菌丝体特征菌丝体白、生长健壮、致密

　　培养物表面菌丝体菌丝体浓密、粗壮，生长均匀，无高温抑制线

　　培养基及菌丝体紧贴瓶壁、无干缩

　　菌丝分泌物允许少量无色至棕黄色水珠

　　杂菌无

　　子实体原基无

　　6.2.9 原种保存

　　菌丝长满后及时使用或置于4 ℃～12 ℃ 保存备用。

　　6.3 栽培种生产

　　6.3.1 段木准备

　　在栽培种生产季节，选择直径10 cm 以上的青冈、栎、栲等阔叶树，在30 d 内将树干及树枝截成

　　20 cm 的段木，将过大的段木劈成大小均匀的扇形木块，装袋前用1% 的石灰水预湿12 h～24 h。

　　6.3.2 填充料准备

　　按照6.2.1 、6.2.2 配料和拌料。

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　　6.3.3 装袋

　　采用规格为(18 cm～20 cm)×(40 cm～42 cm)×0.008 cm 的低压聚乙烯或高压聚丙烯塑料袋。

　　在袋底装入2 cm～3 cm 的填充料，将木块紧密摆放，上端填充2 cm～3 cm 的填充料，用套环加无棉

　　盖体封口。

　　6.3.4 灭菌

　　121 ℃～124 ℃高压蒸汽灭菌2.0 h～2.5 h 或常压蒸汽灭菌18.0 h～24.0 h。

　　6.3.6 接种

　　将原种严格按照无菌操作规程接种在栽培袋内，每袋接种量30 g～50 g 。

　　6.3.7 培养及检查

　　同6.2.6 和6.2.7，菌丝长满后及时移出培养室。

　　6.3.8 栽培种质量标准

　　栽培种感官质量要求见表3。

　　表3 栽培种质量要求

　　菌种外观要求

　　菌丝生长量长满容器

　　菌丝体特征生长均匀、色泽正常、无高温抑制线

　　培养基及菌丝体紧贴袋壁、无干缩

　　杂菌无

　　7 档案管理

　　档案应保存2 年。

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