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DB1302/T 341-2012 水产品中硝基呋喃类代谢物的快速测定 胶体金免疫层析法

  • 文件大小:185.82 KB
  • 标准类型:食品地方标准
  • 标准语言:中文版
  • 文件类型:PDF文档
  • 更新时间:2025-06-07
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资料介绍

​DB1302/T 341-2012《水产品中硝基呋喃类代谢物的快速测定 胶体金免疫层析法》主要内容总结​

​1. 标准基本信息​

  • ​标准编号​​:DB1302/T 341-2012
  • ​标准名称​​:水产品中硝基呋喃类代谢物的快速测定 胶体金免疫层析法
  • ​发布单位​​:唐山市质量技术监督局
  • ​起草单位​​:唐山市畜牧水产品质量监测中心
  • ​适用范围​​:适用于水产品中硝基呋喃类代谢物(包括呋喃唑酮、呋喃它酮、呋喃妥因、呋喃西林的代谢物)的快速筛选测定。

​2. 规范性引用文件​

  • 引用GB/T 6682-2008《分析实验室用水规格和试验方法》,明确实验用水的等级要求(三级水)。

​3. 样品制备与保存​

  • ​样品制备​​:取水产品肌肉组织,剪碎后匀浆。
  • ​保存条件​​:-20℃冰箱贮存备用。

​4. 测定方法原理​

  • ​竞争抑制免疫层析法​​:
    • 样品中的硝基呋喃代谢物与胶体金标记的单克隆抗体结合,抑制抗体与检测线(T)上的代谢物-蛋白偶联物结合。
    • ​阳性结果​​:检测线(T)不显色(代谢物浓度≥检测限)。
    • ​阴性结果​​:检测线(T)显红色(代谢物浓度<检测限)。

​5. 试剂与设备​

  • ​主要试剂​​:
    • 硝基呋喃检测卡(4~30℃避光保存)、乙酸乙酯、衍生化试剂、试剂A/B/C/D(试剂盒自带)。
  • ​仪器设备​​:
    • 组织匀浆机、天平(0.01g精度)、振荡器、离心机(4000 r/min)、氮气吹干装置、微量移液器(20~1000 μL)、计时器。

​6. 试样制备步骤​

  1. ​均质与衍生化​​:
    • 称取3g样品,加水、试剂A和衍生化试剂,65℃水浴孵育30分钟。
  2. ​萃取与净化​​:
    • 加入试剂B、C和乙酸乙酯,振荡离心后取上层有机相。
    • 氮气吹干后,用正己烷溶解,加入试剂D再次离心。

​7. 检测与结果判定​

  • ​操作​​:取80 μL处理液滴加至检测卡加样孔,5~10分钟内观察结果。
  • ​结果判定​​:
    • ​阴性​​:检测线(T)和质控线(C)均显红色。
    • ​阳性​​:仅质控线(C)显红色,检测线(T)不显色。
    • ​无效​​:质控线(C)不显色(需重新检测)。
  • ​注意事项​​:检测卡开封后1小时内使用。

​8. 检测限与确认​

  • ​检测限(LOD)​​:
    • 呋喃唑酮代谢物:1 μg/kg;其他代谢物(呋喃它酮、妥因、西林):2 μg/kg。
  • ​阳性确认​​:需通过液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)进一步验证。

​9. 其他说明​

  • ​标准起草人​​:蒙君丽、李爱军等10人。
  • ​方法特点​​:快速、简便,适用于现场筛查,但阳性结果需结合仪器方法确认。

​总结​​:该标准详细规定了水产品中硝基呋喃代谢物的胶体金免疫层析检测流程,从样品处理到结果判读,强调快速筛选与确证分析的结合,确保检测结果的可靠性。

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