DB14/T 1591-2025 草莓脱毒原原种苗制备技术规程

山西省地方标准DB14/T 1591-2025《草莓脱毒原原种苗制备技术规程》主要内容总结

一、标准更新与适用范围

1. ​版本更新​

   • 代替DB14/T 1591-2018，主要修订内容：
     • 病毒检测方法更新（引用NY/T 3032最新要求）。
     • 新增脱毒原原种苗的保存方式（隔离网室保存）。

2. ​适用范围​

   • 适用于草莓脱毒原原种苗的制备，涵盖外植体选择、脱毒、病毒检测、组培扩繁、驯化移栽等全流程。

二、关键术语定义

1. ​草莓脱毒原原种苗​

   • 通过微茎尖脱毒技术获得，并在无病原隔离环境下生长的组培苗移栽植株。

2. ​微茎尖脱毒​

   • 切取0.2 mm茎尖分生组织进行离体培养，以脱除病毒的技术。

三、核心技术流程

1. ​外植体选择​

   • ​采集时间​：结果后期匍匐茎抽生阶段。
   • ​选择标准​：母株健壮无病，开花结果正常；选取未展开叶片的匍匐茎顶端2 cm作为外植体。

2. ​脱毒与病毒检测​

   • ​方法​：微茎尖脱毒法。
   • ​检测依据​：按NY/T 3032执行（如RT-PCR或ELISA检测）。

3. ​茎尖初代培养​

   • ​消毒流程​：
     • 流水冲洗0.5-2 h → 75%酒精30 s → 1%次氯酸钠10-15 min或0.1%升汞5-10 min → 无菌水冲洗3-5次。
   • ​茎尖切取​：解剖镜下切取0.2 mm分生组织。
   • ​培养条件​：
     • 暗培养2天后转常规培养（25℃、光照3,000-5,000 Lux、14-16 h/d光照、湿度70-75%）。
     • 50-60天形成无根植株后转继代培养。

4. ​组培苗继代扩繁​

   • ​培养基​：按NY/T 3032选择。
   • ​培养参数​：同初代培养条件，每30-40天继代一次，总次数≤7次，总时长≤1年。
   • ​记录要求​：附录A详细登记接种时间、品种、继代次数等。

5. ​生根诱导​

   • ​培养基​：按NY/T 3032选择。
   • ​操作要求​：选2 cm以上健壮幼苗，培养30天至根系发育完成。

6. ​驯化移栽​

   • ​炼苗措施​：
     • 自然光下炼苗7天，温度10-30℃，闭盖→松盖→开盖逐步适应。
   • ​移栽基质​：草炭:蛭石:珍珠岩=4:3:1，复合肥200 g/m³，50孔穴盘装填。
   • ​移栽管理​：
     • 清洗培养基→百菌清800-1,000倍液杀菌→栽后浇透水、覆膜保湿。
     • 移栽后7天内控温25-30℃、湿度≥70%，遮阴管理。

7. ​保存与出圃​

   • ​保存条件​：100目隔离网室，防止介体昆虫传播病毒。
   • ​出圃标准​：三叶一心，按附录B登记出圃信息（时间、品种、数量、去向）。

四、档案管理

• ​记录内容​：外植体来源、接种量、成苗数、环境参数、负责人等。
• ​保存期限​：≥2年，确保可追溯性。

五、附录内容

• ​附录A​：组培生产记录表，记录接种时间、品种、继代次数等。
• ​附录B​：出圃登记表，记录出圃时间、品种、数量及去向。

六、技术要点总结

1. ​核心创新​：新增隔离网室保存，强化病毒防控。
2. ​关键控制点​：
   • 外植体消毒严格把控时间与浓度。
   • 茎尖切取精度（0.2 mm）确保脱毒效果。
   • 继代次数与时长限制防止变异积累。
3. ​操作规范​：从消毒到出圃全程标准化，确保种苗质量。

该标准系统规范了草莓脱毒原原种苗的制备流程，兼顾科学性与实用性，为山西省草莓种苗产业提供了技术保障。