NY/T 4512-2025 非洲菊疫病抗性鉴定技术规程
- 文件大小：6 MB
- 标准类型：农牧渔类
- 标准语言：中文版
- 文件类型：PDF文档
- 更新时间：2025-06-08
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资料介绍
以下是《NY/T 4512-2025 非洲菊疫病抗性鉴定技术规程》的详细内容总结：
一、标准核心内容
1. 适用范围
- 适用于非洲菊（Gerbera jamesonii Bolus）种质对隐地疫霉（Phytophthora cryptogea）引起疫病的抗性鉴定与评价。
2. 鉴定程序
包括5个阶段（见图1流程）：
- 鉴定前准备
- 接种体制备
- 抗性测定
- 抗性评价
- 鉴定后材料处理
二、技术操作细则
1. 鉴定前准备
- 仪器设备：超净工作台、高压灭菌锅、恒温培养箱等。
- 培养基与试剂：
- 10% V8培养基：V8蔬菜汁100mL、CaCO₃ 0.2g、琼脂20g、去离子水900mL（121℃灭菌20min）。
- 10% V8培养液：V8蔬菜汁100mL、CaCO₃ 1g，离心后取上清稀释（1:9），灭菌备用。
- 土壤浸出液：园土500g + 水500mL，静置过滤后0.22μm膜除菌。
2. 接种体制备
- 病原分离与纯化：
- 病样采集：典型病株（茎基部水浸状褐变，见图A.1），4℃保存。
- 表面消毒：75%酒精浸2-3s + 2%次氯酸钠浸3min，灭菌水洗3次。
- 分离培养：病健交界组织接种10% V8平板，25-28℃培养5天。
- 纯化鉴定：单孢分离，形态学确认（菌丝无隔、孢子囊椭圆形，图A.2-A.3），科赫法则验证致病性。
- 接种体繁殖：
- 菌丝丛培养：活化菌株切块接种V8培养液，25-28℃黑暗培养3天。
- 孢子囊诱导：换灭菌水+土壤浸出液3-5滴，25-28℃黑暗培养3-5天（每12-24h换水）。
- 游动孢子悬浮液：4℃冷激15min→20-26℃放置30min释放孢子，调浓度至(1.0~1.5)×10⁵个/mL。
3. 抗性测定
- 温室条件：温度15-30℃、光照20-50klx。
- 材料要求：
- 对照品种：抗病对照（DI≤10）、感病对照（DI>50）。
- 待测材料：NY/T 1592优级苗，每份3重复×30株，随机排列。
- 定植操作：
- 基质：泥炭:园土=1:3（V/V），90-105℃蒸汽消毒30min。
- 栽植：10-15cm花盆，1株/盆，深度2-3cm，20-25℃/15-20℃（昼/夜）。
- 接种方法：
- 时期：定植后11-15天。
- 操作：根际灌注游动孢子悬浮液4mL/株，覆膜保湿48h。
- 病情调查：
- 时间：接种后15-20天（感病对照DI>50时有效）。
- 病情分级（表B.1）：
级别 症状描述 0级 无症状 1级 ≤50%叶片萎蔫 2级 >50%叶片萎蔫但未全萎蔫 3级 全叶片萎蔫+部分干枯 4级 植株枯死 - 病情指数（DI）计算：
DI = /frac{/sum (s /times n)}{N /times S} /times 100
（s：病级值；n：该级株数；N：总株数；S：最高病级值4）
4. 抗性评价
- 有效性判定：感病对照DI>50且抗病对照DI≤10时有效。
- 评价标准（表1）：
病情指数（DI） 抗性级别 0 高抗（HR） 0< DI ≤10 抗（R） 10< DI ≤25 中抗（MR） 25< DI ≤50 感（S） DI >80 高感（HS） - 记录要求：按附录C表格填写鉴定结果（含种质信息、病级株数、DI值等）。
5. 鉴定后处理
- 植物材料：集中焚烧。
- 基质：90-105℃蒸汽消毒30min。
- 病原物：121℃高压灭菌60min。
三、追溯与档案管理
- 记录内容：
- 病样采集信息（时间/地点/症状照片）。
- 培养基配制、病原分离、接种体繁殖过程。
- 定植、接种操作及环境参数。
- 病情调查原始数据与DI计算结果。
- 保存期限：≥24个月，建议信息化管理。
四、附录关键信息
- 附录A（资料性）：
- 病害症状（图A.1）：茎基部水浸状褐变，根部腐烂，白色霉层。
- 病原形态：孢子囊椭圆形（34-64×17-36μm），无乳突（图A.3）。
- 传播途径：土壤中卵孢子经雨水/灌溉水传播。
- 附录B（规范性）：
- 病情分级图示（图B.1）及DI计算公式。
- 附录C（资料性）：
- 抗性鉴定结果记录表示例。
五、参考文献
- 郑小波《疫霉菌及其研究技术》（1997）
- Dictionary of the Fungi（10th Ed., 2008）
总结：本标准系统规范了非洲菊疫病抗性鉴定的全流程操作，从病原分离、接种体制备到温室抗性测定和分级评价，强调标准化操作与可追溯性，为品种抗病性评价提供技术依据。