T/NAIA 0373-2025 牛奶和奶粉中7种抗生素残留量的测定 液相色谱-串联质谱法
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- 标准类型：团体标准规范
- 标准语言：中文版
- 文件类型：PDF文档
- 更新时间：2025-06-17
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资料介绍
以下是团体标准 T/NAIA 03732025《牛奶和奶粉中7种抗生素残留量的测定 液相色谱-串联质谱法》的详细内容总结：
一、标准基本信息
- 标准号：T/NAIA 03732025
- 名称：牛奶和奶粉中7种抗生素残留量的测定 液相色谱-串联质谱法
- 适用范围：
- 检测基质：液态牛奶、奶粉。
- 目标物：甲硝唑、地美硝唑、洛硝达唑、林可霉素、阿奇霉素、替米考星、罗红霉素共7种抗生素残留。
- 归口单位：宁夏化学分析测试协会。
- 起草单位：
- 宁夏回族自治区食品检测研究院（国家市场监督管理总局重点实验室）
- 宁夏计量质量检验检测研究院
- 宁夏化学分析测试协会
二、方法原理
- 提取：
- 牛奶/奶粉样品用 乙腈 提取，加入无水硫酸钠脱水，高速匀浆离心后合并上清液。
- 净化：
- 采用 分散固相萃取法（d-SPE），使用 C₁₈粉末（150mg）和PSA吸附剂（50mg） 净化提取液。
- 浓缩：
- 净化液氮吹浓缩至近干，用 初始流动相（0.1%甲酸水溶液） 复溶至1.0mL。
- 检测：
- 经 C₁₈反相色谱柱分离，以 0.1%甲酸水溶液-0.1%甲酸乙腈溶液 为流动相梯度洗脱。
- 液相色谱-串联质谱（HPLC-MS/MS） 检测，电喷雾正离子模式（ESI⁺） 多反应监测（MRM）。
- 定量：
- 基质匹配外标法校准（标准曲线浓度：0.1–100 ng/mL）。
三、关键试剂与设备
- 主要试剂：
- 乙腈（色谱纯）、甲酸（优级纯）、无水硫酸钠（优级纯）、C₁₈粉末、PSA吸附剂。
- 标准品：
- 7种抗生素标准品（纯度≥98.6%，CAS号及分子式见附录A）。
- 标准溶液配制：
- 储备液（1.0 mg/mL）：乙腈溶解，-18℃避光保存（有效期3个月）。
- 混合工作液（0.1–100 ng/mL）：临用现配，以空白基质溶液稀释。
- 仪器设备：
- HPLC-MS/MS（ESI源）、高速离心机（≥8000 r/min）、涡旋混合器、氮吹仪、0.22μm有机滤膜。
四、分析流程
- 样品制备：
- 牛奶：-18℃避光保存；奶粉：常温避光保存。
- 提取：
- 牛奶（5g）或奶粉（1g）加乙腈（10mL）提取两次，合并上清液定容至25mL。
- 净化：
- 取10mL提取液，加入C₁₈+PSA吸附剂涡旋离心，取5mL上清液氮吹浓缩。
- 色谱条件：
- 色谱柱：C₁₈柱（2.1 mm×150 mm, 3.5 μm）。
- 流动相：A（0.1%甲酸水）-B（0.1%甲酸乙腈），梯度洗脱（见表1）。
- 流速：0.3 mL/min；进样量：5μL。
- 质谱条件：
- 离子源：ESI⁺；扫描模式：MRM；
- 关键参数：鞘气流速10 L/min，毛细管电压3500V，喷嘴电压500V。
- 各化合物母离子/子离子对及碰撞能量见附录B（如甲硝唑：172.1→128.1，碰撞能9eV）。
五、结果判定与计算
- 定性确证：
- 保留时间偏差 ≤±2.5%；
- 离子丰度比偏差符合标准要求（如丰度＞50%时允许±20%偏差）。
- 定量计算：
- 公式：
X = /frac{C /times V /times 1000}{m /times 1000} /times fX：残留量（μg/kg）；C：试样浓度（ng/mL）；V：定容体积（mL）；m：试样质量（g）；f：稀释倍数。
- 公式：
- 精密度：
- 平行测定结果的绝对差值 ≤算术平均值的10%。
- 定量限（LOQ）：
- 所有目标物均为1.0 μg/kg。
六、附录内容
- 附录A：
- 7种抗生素的标准品信息（名称、分子式、CAS号、纯度）。
- 附录B：
- 质谱参数表（母离子、子离子、碎裂电压、碰撞能量），标注定量离子对。
- 附录C：
- 7种抗生素的定量离子对典型色谱图（示例图未提供）。
七、注意事项
- 专利声明：标准可能涉及专利，发布机构不承担识别责任。
- 空白试验：全程需同步进行空白对照。
- 保存条件：标准溶液-18℃避光保存，有效期明确（储备液3个月，混合液1个月）。
总结特点：
该标准建立了高效、灵敏的HPLC-MS/MS方法，覆盖硝基咪唑类（甲硝唑等）和大环内酯类（阿奇霉素等）7种抗生素，适用于乳制品中痕量残留（LOQ=1μg/kg）的检测，强调基质匹配校准以消除基质效应，操作流程标准化且精密度要求严格（RSD≤10%）。