T/GXDSL 024-2024 器官、类器官低温存贮技术规范
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资料介绍
ICS 19 .020
M731
团体标准
T/GXDSL 024—2024
器官、类器官低温存贮技术规范
Technical Specifications for Low-temperature Storage of Organs and Organoids
2024 - 12 - 28 发布2024 - 12 - 29 实施
广西电子商务企业联合会发布
目 次
前 言............................................................................. II
一、范围.............................................................................. 1
二、规范性引用文件.................................................................... 1
三、术语和定义........................................................................ 1
1. 器官............................................................................. 1
2. 类器官........................................................................... 2
3. 低温存贮......................................................................... 2
四、基本要求.......................................................................... 2
1. 人员资质......................................................................... 2
2. 设施与环境....................................................................... 2
五、供体评估与筛选.................................................................... 3
1. 器官供体评估..................................................................... 3
2. 类器官供体评估................................................................... 3
六、低温存贮前处理.................................................................... 3
1. 器官处理......................................................................... 3
2. 类器官处理....................................................................... 4
七、低温存贮方法与设备................................................................ 4
1. 低温存贮方法..................................................................... 4
2. 低温存贮设备..................................................................... 4
八、存贮过程监测与管理................................................................ 5
1. 温度监测......................................................................... 5
2. 样本信息管理..................................................................... 5
九、复苏与质量评估.................................................................... 5
1. 复苏方法......................................................................... 5
2. 质量评估......................................................................... 6
十、安全与伦理要求.................................................................... 6
1. 生物安全......................................................................... 6
2. 伦理要求......................................................................... 6
十一、附则............................................................................ 7
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II
前 言
本文件依据GB/T 1.1-2020 《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起
草。
请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。
本文件由广西产学研科学研究院提出。
本文件由广西电子商务企业联合会归口。
本文件起草单位：广西研科院高新技术有限公司，广西产学研科学研究院，广西研科院传媒有限公
司，广西蓝脑科技有限公司，西安蓝脑科技有限公司，广西泽灵科技有限公司。
本文件主要起草人：庄文斌，周伯韬，韦新，甘汉才,周广,梅华,赖桂华，张婷。
本文件为首次发布。
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1
器官、类器官低温存贮技术规范
一、范围
本标准规定了器官及类器官低温存贮的术语和定义、基本要求、供体评估与筛选、低温存贮前处理、
低温存贮方法与设备、存贮过程监测与管理、复苏与质量评估以及安全与伦理要求等内容。
本标准适用于各类器官（如肝脏、肾脏、心脏等）及类器官（如肝类器官、肠类器官等）在低温环
境下的存贮操作，旨在确保存贮过程的安全性、有效性和规范性，提高器官及类器官的利用率和移植成
功率。
二、规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。
凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。
• 《中华人民共和国生物安全法》
• 《人体器官移植条例》
• GB/T 37864 生物样本库质量和能力通用要求
• ISO 22859:2020 生物技术- 低温保存- 生物材料低温保存的要求
三、术语和定义
1. 器官
指动物或人体中具有特定功能的独立解剖结构，如心脏、肝脏、肾脏等，由多种组织构成，能够完
成复杂的生理功能。
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2. 类器官
是一种三维培养的细胞聚集体，具有类似天然器官的结构和功能特征，通过特定的干细胞或祖细胞
在体外培养形成，如肝类器官、脑类器官等。
3. 低温存贮
将器官或类器官置于低温环境（通常低于-80℃）中，通过减缓细胞代谢和生物化学反应速度，延
长其存活时间并保持其生物学活性和功能的技术过程。
四、基本要求
1. 人员资质
• 从事器官及类器官低温存贮的专业人员应具备医学、生物学、低温生物学等相关专业背景知识，
经过专门的培训并取得相应的资质证书。
• 包括负责供体评估的医学专家、掌握低温存贮技术的技术人员以及质量管理人员等，人员应定期
接受继续教育和技能考核，确保其知识和技能的更新与提升。
2. 设施与环境
• 建立专门的低温存贮设施，包括低温冰箱、液氮罐、低温保存箱等设备，设施应放置在清洁、干
燥、通风良好且温度相对稳定的环境中，避免阳光直射和靠近热源、震源等。
• 存贮场所应具备完善的电力供应系统和备用电源，以确保低温设备的持续运行，防止因停电导致
温度波动而影响器官及类器官的质量。
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五、供体评估与筛选
1. 器官供体评估
• 对于器官供体，应进行全面的医学评估，包括供体的年龄、健康状况、死因、传染病筛查（如艾
滋病、乙肝、丙肝、梅毒等）、器官功能检测（如心脏功能、肝功能、肾功能指标等）等。
• 评估结果应详细记录并保存，只有符合相关医学标准和伦理要求的器官方可进入低温存贮流程，
例如，心脏供体年龄一般不宜超过60 岁，肝功能指标应在正常范围的一定倍数内等，具体标准依据不
同器官类型和临床实践确定。
2. 类器官供体评估
• 类器官供体来源的细胞或组织应明确其来源和特性，如干细胞的类型、分化潜能、遗传背景等。
• 对供体来源的材料进行微生物检测，确保无细菌、真菌、支原体等污染，同时评估其在体外培养
形成类器官的能力和效率，只有质量合格的类器官供体材料才能用于后续的培养和低温存贮。
六、低温存贮前处理
1. 器官处理
• 器官获取后应尽快进行灌注处理，采用合适的灌注液（如UW 液、HTK 液等），灌注压力和流速
应根据器官类型进行调整，例如肝脏灌注压力一般在8 - 12 mmHg，流速为100 - 150 ml/min，以清
除血液和代谢产物，减少缺血再灌注损伤。
• 灌注后进行器官修整，去除多余的脂肪、结缔组织等，对器官的血管、胆管等结构进行必要的处
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理和标记，处理过程应在无菌环境下进行，操作时间应尽量缩短，一般器官获取至低温存贮的时间间隔
不宜超过6 - 8 小时（不同器官有差异）。
2. 类器官处理
• 类器官在培养至合适阶段后，进行收集和清洗，去除培养液中的杂质和死细胞，采用温和的离心
或过滤方法，离心转速一般不超过1000 rpm，时间5 - 10 分钟。
• 可根据需要对类器官进行预处理，如添加保护剂（如二甲基亚砜、海藻糖等），保护剂的浓度应
根据类器官的类型和特性进行优化，一般二甲基亚砜浓度在5% - 15%之间，海藻糖浓度在0.1 - 0.5 M
之间，以提高其低温存贮的耐受性。
七、低温存贮方法与设备
1. 低温存贮方法
• 根据器官及类器官的类型和特性选择合适的低温存贮方法，如慢冻法、玻璃化法等。
• 慢冻法：以一定的降温速率（如-1℃/min 至-5℃/min）将器官或类器官温度降低至-80℃以
下，然后转移至液氮中进行长期存贮，降温过程中需精确控制温度变化，防止冰晶形成对细胞造成损伤。
• 玻璃化法：将高浓度的保护剂快速注入器官或类器官，然后迅速投入液氮中，使细胞内液体形成
玻璃态而非冰晶态，玻璃化溶液的配方应根据不同组织进行调整，保护剂的种类和浓度组合需经过严格
筛选和验证。
2. 低温存贮设备
• 低温冰箱：应具备精确的温度控制功能，温度波动范围不超过±2℃，能够达到-80℃以下的低
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温环境，冰箱内应配备温度监测装置和报警系统，当温度异常时能及时发出警报。
• 液氮罐：采用高质量的液氮罐，具有良好的绝热性能，液氮挥发率低，应定期检查液氮量并及时
补充，确保存贮样本始终处于液氮环境中，液氮罐应放置在安全位置，防止倾倒和泄漏。
八、存贮过程监测与管理
1. 温度监测
• 在器官及类器官低温存贮过程中，应采用高精度的温度传感器对存贮设备内的温度进行实时监
测，监测数据应进行记录和保存，保存期限不少于存贮周期结束后5 年。
• 温度监测频率不少于每30 分钟一次，当温度超出设定范围时，应立即启动应急预案，检查设备
故障并采取相应的纠正措施，如调整冰箱温度设置、补充液氮等，确保温度迅速恢复正常。
2. 样本信息管理
• 建立完善的器官及类器官样本信息管理系统，对每一个样本的供体信息、处理过程信息、存贮位
置信息、存贮时间等进行详细记录和信息化管理。
• 样本信息应具有可追溯性，通过唯一的标识编码（如条形码、二维码等）能够快速查询和获取样
本的相关信息，便于样本的管理、调配和质量跟踪。
九、复苏与质量评估
1. 复苏方法
• 从低温存贮中取出器官或类器官后，应根据其存贮方法采用相应的复苏程序。
• 对于慢冻法存贮的样本，采用快速升温的方法，如将样本置于37℃ - 42℃的水浴中快速解冻，
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解冻时间应严格控制，一般器官解冻时间不超过10 - 15 分钟，类器官不超过5 - 10 分钟，同时应
在复苏液中进行，以减轻细胞损伤。
• 玻璃化法存贮的样本，需先去除玻璃化保护剂，采用逐步稀释或透析的方法，稀释液的成分和渗
透压应根据样本特性进行调整，去除保护剂的时间和步骤应经过优化，防止因保护剂残留或渗透压变化
导致细胞损伤。
2. 质量评估
• 复苏后的器官及类器官应进行全面的质量评估，包括细胞活性检测（如采用台盼蓝拒染法、ATP 含
量测定等，细胞活性应达到一定比例，如器官细胞活性一般不低于50% - 60%，类器官细胞活性不低于
70% - 80%）、组织结构完整性评估（通过组织学染色、显微镜观察等方法，检查血管、实质细胞等结
构是否完整）、功能检测（如器官的灌流功能、类器官的分泌功能等是否恢复到一定水平）等。
• 只有质量评估合格的器官及类器官才能用于后续的移植或研究等用途，对于质量不合格的样本应
进行记录和分析，总结经验教训，改进存贮和复苏技术。
十、安全与伦理要求
1. 生物安全
• 在器官及类器官低温存贮过程中，应严格遵守生物安全相关规定，防止交叉污染和生物危害物质
的传播。
• 对供体进行严格的传染病筛查，对于感染性供体的器官或类器官应采取特殊的处理和存贮措施，
如单独隔离存贮、采用专门的消毒和防护设备等，确保操作人员和环境的安全。
2. 伦理要求
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• 器官及类器官的低温存贮应遵循伦理原则，确保供体的知情同意权，供体或其家属应在充分了解
存贮目的、过程、风险和受益等情况下签署知情同意书。
• 存贮和使用过程应接受伦理委员会的监督和审查，对于涉及人类胚胎干细胞来源的类器官等敏感
问题，应严格按照相关伦理规范和法律法规进行操作，确保研究和应用的合法性和伦理性。
十一、附则
1. 本标准自发布之日起实施。
2. 本标准结合器官及类器官低温存贮领域的最新技术和实践经验制定，在供体评估、存贮方法、
质量控制等方面具有创新性和前瞻性，填补了相关领域标准的空白，为推动器官及类器官低温存贮技术
的规范化发展提供重要依据。
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团体标准
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Technical Specifications for Low-temperature Storage of Organs and Organoids
2024 - 12 - 28 发布2024 - 12 - 29 实施
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目 次
前 言............................................................................. II
一、范围.............................................................................. 1
二、规范性引用文件.................................................................... 1
三、术语和定义........................................................................ 1
1. 器官............................................................................. 1
2. 类器官........................................................................... 2
3. 低温存贮......................................................................... 2
四、基本要求.......................................................................... 2
1. 人员资质......................................................................... 2
2. 设施与环境....................................................................... 2
五、供体评估与筛选.................................................................... 3
1. 器官供体评估..................................................................... 3
2. 类器官供体评估................................................................... 3
六、低温存贮前处理.................................................................... 3
1. 器官处理......................................................................... 3
2. 类器官处理....................................................................... 4
七、低温存贮方法与设备................................................................ 4
1. 低温存贮方法..................................................................... 4
2. 低温存贮设备..................................................................... 4
八、存贮过程监测与管理................................................................ 5
1. 温度监测......................................................................... 5
2. 样本信息管理..................................................................... 5
九、复苏与质量评估.................................................................... 5
1. 复苏方法......................................................................... 5
2. 质量评估......................................................................... 6
十、安全与伦理要求.................................................................... 6
1. 生物安全......................................................................... 6
2. 伦理要求......................................................................... 6
十一、附则............................................................................ 7
T/GXDSL 024—2024
II
前 言
本文件依据GB/T 1.1-2020 《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起
草。
请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。
本文件由广西产学研科学研究院提出。
本文件由广西电子商务企业联合会归口。
本文件起草单位：广西研科院高新技术有限公司，广西产学研科学研究院，广西研科院传媒有限公
司，广西蓝脑科技有限公司，西安蓝脑科技有限公司，广西泽灵科技有限公司。
本文件主要起草人：庄文斌，周伯韬，韦新，甘汉才,周广,梅华,赖桂华，张婷。
本文件为首次发布。
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器官、类器官低温存贮技术规范
一、范围
本标准规定了器官及类器官低温存贮的术语和定义、基本要求、供体评估与筛选、低温存贮前处理、
低温存贮方法与设备、存贮过程监测与管理、复苏与质量评估以及安全与伦理要求等内容。
本标准适用于各类器官（如肝脏、肾脏、心脏等）及类器官（如肝类器官、肠类器官等）在低温环
境下的存贮操作，旨在确保存贮过程的安全性、有效性和规范性，提高器官及类器官的利用率和移植成
功率。
二、规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。
凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。
• 《中华人民共和国生物安全法》
• 《人体器官移植条例》
• GB/T 37864 生物样本库质量和能力通用要求
• ISO 22859:2020 生物技术- 低温保存- 生物材料低温保存的要求
三、术语和定义
1. 器官
指动物或人体中具有特定功能的独立解剖结构，如心脏、肝脏、肾脏等，由多种组织构成，能够完
成复杂的生理功能。
T/GXDSL 024—2024
2
2. 类器官
是一种三维培养的细胞聚集体，具有类似天然器官的结构和功能特征，通过特定的干细胞或祖细胞
在体外培养形成，如肝类器官、脑类器官等。
3. 低温存贮
将器官或类器官置于低温环境（通常低于-80℃）中，通过减缓细胞代谢和生物化学反应速度，延
长其存活时间并保持其生物学活性和功能的技术过程。
四、基本要求
1. 人员资质
• 从事器官及类器官低温存贮的专业人员应具备医学、生物学、低温生物学等相关专业背景知识，
经过专门的培训并取得相应的资质证书。
• 包括负责供体评估的医学专家、掌握低温存贮技术的技术人员以及质量管理人员等，人员应定期
接受继续教育和技能考核，确保其知识和技能的更新与提升。
2. 设施与环境
• 建立专门的低温存贮设施，包括低温冰箱、液氮罐、低温保存箱等设备，设施应放置在清洁、干
燥、通风良好且温度相对稳定的环境中，避免阳光直射和靠近热源、震源等。
• 存贮场所应具备完善的电力供应系统和备用电源，以确保低温设备的持续运行，防止因停电导致
温度波动而影响器官及类器官的质量。
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五、供体评估与筛选
1. 器官供体评估
• 对于器官供体，应进行全面的医学评估，包括供体的年龄、健康状况、死因、传染病筛查（如艾
滋病、乙肝、丙肝、梅毒等）、器官功能检测（如心脏功能、肝功能、肾功能指标等）等。
• 评估结果应详细记录并保存，只有符合相关医学标准和伦理要求的器官方可进入低温存贮流程，
例如，心脏供体年龄一般不宜超过60 岁，肝功能指标应在正常范围的一定倍数内等，具体标准依据不
同器官类型和临床实践确定。
2. 类器官供体评估
• 类器官供体来源的细胞或组织应明确其来源和特性，如干细胞的类型、分化潜能、遗传背景等。
• 对供体来源的材料进行微生物检测，确保无细菌、真菌、支原体等污染，同时评估其在体外培养
形成类器官的能力和效率，只有质量合格的类器官供体材料才能用于后续的培养和低温存贮。
六、低温存贮前处理
1. 器官处理
• 器官获取后应尽快进行灌注处理，采用合适的灌注液（如UW 液、HTK 液等），灌注压力和流速
应根据器官类型进行调整，例如肝脏灌注压力一般在8 - 12 mmHg，流速为100 - 150 ml/min，以清
除血液和代谢产物，减少缺血再灌注损伤。
• 灌注后进行器官修整，去除多余的脂肪、结缔组织等，对器官的血管、胆管等结构进行必要的处
T/GXDSL 024—2024
4
理和标记，处理过程应在无菌环境下进行，操作时间应尽量缩短，一般器官获取至低温存贮的时间间隔
不宜超过6 - 8 小时（不同器官有差异）。
2. 类器官处理
• 类器官在培养至合适阶段后，进行收集和清洗，去除培养液中的杂质和死细胞，采用温和的离心
或过滤方法，离心转速一般不超过1000 rpm，时间5 - 10 分钟。
• 可根据需要对类器官进行预处理，如添加保护剂（如二甲基亚砜、海藻糖等），保护剂的浓度应
根据类器官的类型和特性进行优化，一般二甲基亚砜浓度在5% - 15%之间，海藻糖浓度在0.1 - 0.5 M
之间，以提高其低温存贮的耐受性。
七、低温存贮方法与设备
1. 低温存贮方法
• 根据器官及类器官的类型和特性选择合适的低温存贮方法，如慢冻法、玻璃化法等。
• 慢冻法：以一定的降温速率（如-1℃/min 至-5℃/min）将器官或类器官温度降低至-80℃以
下，然后转移至液氮中进行长期存贮，降温过程中需精确控制温度变化，防止冰晶形成对细胞造成损伤。
• 玻璃化法：将高浓度的保护剂快速注入器官或类器官，然后迅速投入液氮中，使细胞内液体形成
玻璃态而非冰晶态，玻璃化溶液的配方应根据不同组织进行调整，保护剂的种类和浓度组合需经过严格
筛选和验证。
2. 低温存贮设备
• 低温冰箱：应具备精确的温度控制功能，温度波动范围不超过±2℃，能够达到-80℃以下的低
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温环境，冰箱内应配备温度监测装置和报警系统，当温度异常时能及时发出警报。
• 液氮罐：采用高质量的液氮罐，具有良好的绝热性能，液氮挥发率低，应定期检查液氮量并及时
补充，确保存贮样本始终处于液氮环境中，液氮罐应放置在安全位置，防止倾倒和泄漏。
八、存贮过程监测与管理
1. 温度监测
• 在器官及类器官低温存贮过程中，应采用高精度的温度传感器对存贮设备内的温度进行实时监
测，监测数据应进行记录和保存，保存期限不少于存贮周期结束后5 年。
• 温度监测频率不少于每30 分钟一次，当温度超出设定范围时，应立即启动应急预案，检查设备
故障并采取相应的纠正措施，如调整冰箱温度设置、补充液氮等，确保温度迅速恢复正常。
2. 样本信息管理
• 建立完善的器官及类器官样本信息管理系统，对每一个样本的供体信息、处理过程信息、存贮位
置信息、存贮时间等进行详细记录和信息化管理。
• 样本信息应具有可追溯性，通过唯一的标识编码（如条形码、二维码等）能够快速查询和获取样
本的相关信息，便于样本的管理、调配和质量跟踪。
九、复苏与质量评估
1. 复苏方法
• 从低温存贮中取出器官或类器官后，应根据其存贮方法采用相应的复苏程序。
• 对于慢冻法存贮的样本，采用快速升温的方法，如将样本置于37℃ - 42℃的水浴中快速解冻，
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解冻时间应严格控制，一般器官解冻时间不超过10 - 15 分钟，类器官不超过5 - 10 分钟，同时应
在复苏液中进行，以减轻细胞损伤。
• 玻璃化法存贮的样本，需先去除玻璃化保护剂，采用逐步稀释或透析的方法，稀释液的成分和渗
透压应根据样本特性进行调整，去除保护剂的时间和步骤应经过优化，防止因保护剂残留或渗透压变化
导致细胞损伤。
2. 质量评估
• 复苏后的器官及类器官应进行全面的质量评估，包括细胞活性检测（如采用台盼蓝拒染法、ATP 含
量测定等，细胞活性应达到一定比例，如器官细胞活性一般不低于50% - 60%，类器官细胞活性不低于
70% - 80%）、组织结构完整性评估（通过组织学染色、显微镜观察等方法，检查血管、实质细胞等结
构是否完整）、功能检测（如器官的灌流功能、类器官的分泌功能等是否恢复到一定水平）等。
• 只有质量评估合格的器官及类器官才能用于后续的移植或研究等用途，对于质量不合格的样本应
进行记录和分析，总结经验教训，改进存贮和复苏技术。
十、安全与伦理要求
1. 生物安全
• 在器官及类器官低温存贮过程中，应严格遵守生物安全相关规定，防止交叉污染和生物危害物质
的传播。
• 对供体进行严格的传染病筛查，对于感染性供体的器官或类器官应采取特殊的处理和存贮措施，
如单独隔离存贮、采用专门的消毒和防护设备等，确保操作人员和环境的安全。
2. 伦理要求
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• 器官及类器官的低温存贮应遵循伦理原则，确保供体的知情同意权，供体或其家属应在充分了解
存贮目的、过程、风险和受益等情况下签署知情同意书。
• 存贮和使用过程应接受伦理委员会的监督和审查，对于涉及人类胚胎干细胞来源的类器官等敏感
问题，应严格按照相关伦理规范和法律法规进行操作，确保研究和应用的合法性和伦理性。
十一、附则
1. 本标准自发布之日起实施。
2. 本标准结合器官及类器官低温存贮领域的最新技术和实践经验制定，在供体评估、存贮方法、
质量控制等方面具有创新性和前瞻性，填补了相关领域标准的空白，为推动器官及类器官低温存贮技术
的规范化发展提供重要依据。